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如何有效減少細(xì)胞計(jì)數(shù)板的誤差?

  • 發(fā)布日期:2021-07-27      瀏覽次數(shù):1103
    •   細(xì)胞計(jì)數(shù)板的血細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差分別來(lái)源于技術(shù)誤差和固有誤差。其中由于操作人員采血不順利,器材處理、使用不當(dāng),稀釋不準(zhǔn)確,細(xì)胞識(shí)別錯(cuò)誤等因素所造成的誤差屬技術(shù)誤差;而由于儀器(計(jì)數(shù)板、蓋片、吸管等)不夠準(zhǔn)確與精密帶來(lái)的誤差稱(chēng)儀器誤差,由于細(xì)胞分布不均勻等因素帶來(lái)的細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差屬于分布誤差或計(jì)數(shù)域誤差。儀器誤差和分布誤差統(tǒng)稱(chēng)為固有誤差或系統(tǒng)誤差。技術(shù)誤差和儀器誤差可通過(guò)規(guī)范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正,但細(xì)胞分布誤差卻難于*消除。因此,搞好紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制一般需采用以下措施。1.避免技術(shù)誤差,糾正儀器誤差
       
        (1)所用器材均應(yīng)清潔干燥,計(jì)數(shù)板、血蓋片、微量吸管及刻度吸管的規(guī)格應(yīng)符合要求或經(jīng)過(guò)校正。①計(jì)數(shù)板的鑒定:要求計(jì)數(shù)室的臺(tái)面光滑、透明,劃線清晰,計(jì)數(shù)室劃線面積準(zhǔn)確。必要時(shí)采用嚴(yán)格校正的目鏡測(cè)微計(jì)測(cè)量計(jì)數(shù)室的邊長(zhǎng)與底面積,用微米千分尺測(cè)量計(jì)數(shù)室的深度。美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局(NBS)規(guī)定每個(gè)大方格邊長(zhǎng)的誤差應(yīng)小于1%,即1±0.01mm,深度誤差應(yīng)小于2%,即0.1±0.002mm。若超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)棄之不用。②血蓋片應(yīng)具有一定的重量,平整、光滑、無(wú)裂痕,厚薄均勻一致,可使用卡尺多點(diǎn)測(cè)量(至少在9個(gè)點(diǎn)),不均勻度在0.002mm之內(nèi)。必要時(shí)采用平面平行儀進(jìn)行測(cè)量與評(píng)價(jià),要求呈現(xiàn)密集平行的直線干涉條紋。較簡(jiǎn)單的評(píng)價(jià)方法是將潔凈的蓋片緊貼于干燥的平面玻璃上,若能吸附一定的時(shí)間不脫落,落下時(shí)呈弧線形旋轉(zhuǎn),表示蓋片平整、厚薄均勻。同時(shí),合格的蓋片放置在計(jì)數(shù)室表面后,與支持柱緊密接觸的部位可見(jiàn)到彩虹。精選出的蓋片與其他蓋片緊密重合后,在掠射光線下觀察,如見(jiàn)到完整平行的彩虹條紋表示另一枚蓋片質(zhì)量也符合要求。③目前臨床實(shí)驗(yàn)室多采用一次性微量采血管采集毛細(xì)血管血,除注意定點(diǎn)購(gòu)買(mǎi)使用信譽(yù)較好廠家的產(chǎn)品外,還應(yīng)對(duì)每一批量的采血管進(jìn)行抽樣檢查,可通過(guò)水銀稱(chēng)重法或有色溶液比色法進(jìn)行校正,誤差不應(yīng)超過(guò)±1%。
       
        (2)紅細(xì)胞稀釋液應(yīng)等滲、新鮮、無(wú)雜質(zhì)微粒。
       
        (3)嚴(yán)格操作,從消毒、采血、稀釋、充池到計(jì)數(shù)都應(yīng)規(guī)范,尤其應(yīng)注意的是血樣稀釋及充池時(shí)既要作到充分混勻,又要防止劇烈震蕩為破壞紅細(xì)胞。必須一次性充滿(mǎn)計(jì)數(shù)室,防止產(chǎn)生氣泡,充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與血蓋片之間的矩形邊緣為宜。
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